Síntese em fase sólida Fmoc/t-Bu

O método Fmoc é um novo método para  síntese de peptídeos em fase sólida  Desenvolvido por Carpino e Hart com base no método Boc.

A diferença fundamental entre a estratégia Fmoc/t-Bu (9-fluorenilmetoxicarbonil/terc-butóxi) e a estratégia Boc/Bzl reside no uso do grupo protetor Fmoc, removível por álcali, para o grupo α-amino; a cadeia lateral é protegida pelo t-Bu, que pode ser removido por TFA; e utiliza-se a resina Wang, um suporte de fase sólida com um braço de ligação sensível a ácidos, sendo a etapa final da síntese realizada com TFA. Han Xiang et al. Sintetizou-se com sucesso o peptídeo timosina α 1 de 32 aminoácidos pelo método de fase sólida Fm oc, partindo de Fm oc-Asn(Trt)-W angResin, onde o grupo Boc protege o grupo amino da cadeia lateral da lisina, o grupo éster terc-butílico (Ot-Bu) protege o grupo carboxila da cadeia lateral do aspartato e do glutamato, o grupo t-Bu protege o grupo hidroxila da cadeia lateral da serina e da treonina, e o grupo tritil (Trt) protege o grupo amida da cadeia lateral da asparagina. O rendimento total da síntese foi de 33,2% e a pureza foi superior a 98,8%.

O aminoácido protegido por Fmoc é sensível a bases, especialmente aminas secundárias, e pode ser removido com piperidina à temperatura ambiente. Nessas condições, os grupos protetores de aminoácidos baseados em Z, Boc ou outros permanecem inalterados.

O grupo protetor Fmoc é estável em meio ácido e pode ser removido em condições alcalinas brandas. Ele pode ser usado de forma ortogonal a grupos protetores de cadeia lateral sensíveis a ácidos, apresentando as vantagens de condições de reação brandas, menos reações secundárias e alto rendimento. 

A purificação do produto também é facilitada quando o análogo poliarílico do grupo protetor Fmoc é ligado ao N-terminal do polipeptídeo e da proteína. Ao mesmo tempo, o grupo Fmoc possui absorção ultravioleta característica e é fácil de monitorar e controlar a reação, por isso está se tornando cada vez mais popular. 

Além disso, com o desenvolvimento da indústria de síntese de peptídeos, o custo do Fmoc para proteger as matérias-primas de aminoácidos foi bastante reduzido, e o método Fmoc substituiu gradualmente o método Boc e é amplamente utilizado na síntese em fase sólida.