Seplife ®Resina de cromatografia em agarose de fluxo rápido 6FF

Resina para cromatografia em agarose de fluxo rápido

Seplife 6FF

Seplife ®Perfil do produto em resina de cromatografia de agarose de fluxo rápido 6FF:

Seplife ® 6FF  resina de cromatografia de agarose de fluxo rápido  é formado por reticulação em Seplife ® 6B  meio de cromatografia em agarose . Sua estabilidade química e propriedades físicas são significativamente melhoradas com altas taxas de fluxo, alta carga e baixa adsorção específica. Possui alta taxa de recuperação e pode ser reutilizado diversas vezes. Pode ser usado para  cromatografia de filtração em gel  e  purificação de proteínas ,  ácidos nucleicos  e  peptídeos  a jusante de  biofarmacêutica e bioengenharia .

Seplife ®6FF Cromatografia em Agarose de Fluxo Rápido Parâmetros de resina:

Seplife ®6FF Cromatografia em Agarose de Fluxo Rápido Resina  Instrução de teste:

1. Embalagem de coluna
A embalagem é realizada de acordo com procedimentos operacionais padrão. Deve-se garantir que cada material esteja em temperatura operacional e que o gel precise ser desgaseificado antes de ser embalado.
2.Equilíbrio
Equilibre a coluna com 2 a 5 volumes de coluna da balança de carga, certificando-se de que a condutividade e o pH do efluente sejam exatamente iguais à condutividade e ao pH do tampão de carga.
3. Carregamento de amostra
(1) A amostra é preparada com um tampão e a amostra turva é centrifugada e filtrada para carregamento. Amostras com teor excessivo de sal e concentração muito pequena devem ser tratadas primeiro e depois carregadas.
(2) A separação dos componentes da amostra pelo meio é realizada de acordo com o peso molecular dos componentes, e o peso molecular é primeiro eliminado.
(3) O volume de carga é de cerca de 1-2% do volume da coluna e quanto menor, melhor desempenho de separação.
4.Eluição
A eluição foi realizada com tampão e a vazão e a composição do tampão foram mantidas constantes durante a eluição.
5.Regeneração
Geralmente é lavado com um tampão para equilibrar e pode ser usado novamente. Algumas proteínas ou lipídios inativados não podem ser removidos durante a regeneração e podem ser removidos por limpeza no local (CIP).
6.CIP
(1) Para uma proteína ligada a íons, ela pode ser removida com 0,5 a 1 volume de leito de coluna de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas ou lipídios ligados hidrofobicamente, ele pode ser removido com 1 volume de leito de coluna de NaOH 0,1 M. (3) Para proteínas, lipídios, etc. fortemente ligados hidrofobicamente, pode ser lavado com 4 a 10 volumes de coluna de etanol a 70% ou isopropanol a 30%. No entanto, deve notar-se que a concentração do solvente orgânico é gradualmente aumentada de forma gradiente, caso contrário são facilmente geradas bolhas.
Após a conclusão da limpeza, equilibre a coluna com pelo menos 3 volumes de leito de tampão de equilíbrio até que o pH e a condutância permaneçam inalterados.
7.Armazenamento
Selado e armazenado a 4~30°C (20% de etanol em solução de armazenamento), seco, ventilado, limpo, não congelado; as colunas usadas são armazenadas em solução de etanol a 20% a 4%.

Seplife ®6FF Cromatografia em Agarose de Fluxo Rápido Resina  Cuidado:

(1) O volume da amostra deve ser concentrado tanto quanto possível antes de usar a filtração em gel.
(2)A amostra deve ser clarificada sem partículas.
(3)Para obter a maior resolução, o volume de carga não pode exceder 5% do volume do leito.
(4) A cromatografia em coluna deve ser realizada após a amostra e o meio cromatográfico deve ser completamente equilibrado com o tampão de eluição.
(5) O leito da coluna deve ser plano, livre de ranhuras e bolhas de ar, caso contrário deverá ser remontado.
(6) Para proteger a estabilidade e atividade da proteína, é selecionada uma proteína de purificação tampão.
(7) Para evitar interação iônica não específica entre proteína e meio, até 0,15 mol/L de NaCl podem ser adicionados ao tampão.
(8) De acordo com o peso molecular da proteína alvo, o meio mais próximo da faixa de separação mediana é selecionado.
(9) A vazão deve ser rigorosamente controlada durante o processo de eluição e não muito rápida.
(10) Durante o carregamento e todo o processo de eluição, a superfície do cilindro é impedida de secar.
(11)Este produto deve evitar contato com agentes oxidantes e evitar exposição prolongada ao ar.