Novas resinas Oligo dT para purificação e isolamento de mRNA: explorando novas tecnologias baseadas em esferas magnéticas semeadas e resinas de estireno/DVB jateadas

O novo Sunresin Seplife ®A resina de afinidade Oligo dT é projetada para a purificação e isolamento de mRNA de processos de fabricação de transcrição in vitro (IVT). Usando os 20 anos de experiência da Sunresin na fabricação de resinas especiais, projetamos uma tecnologia exclusiva que fabrica uma resina polimérica de 50 mícrons com tamanhos de partículas muito uniformes por inchaço de sementes. A resina é uma resina de poliestireno divinilbenzeno reticulada funcionalizada com oligo dT20. A resina captura efetivamente mRNA de componentes do processo de reação de transcrição, como enzimas e DNA plasmídico.

Seplife ® O Oligo dT foi projetado para atender à crescente demanda em seletividade, capacidade e purificação downstream em larga escala de uma gama de construções de mRNA usadas em vacinas, como a vacina de mRNA COVID-19, vacinas oncológicas, vacinas contra AIDS, tratamento e prevenção de doenças raras e outras doenças importantes. Esta resina permite capturar seletivamente o mRNA por meio da cauda poliadenilada (poliA) usando etapas simples de purificação à base de sal (0,5 M NaCl) e água.

As principais características do Oligo dT combinam a fácil purificação de mRNA a partir da mistura de transcrição bruta para remover efetivamente o DNA plasmídico e outros componentes do IVT, fluxo de trabalho simplificado graças à fácil adaptação a diferentes tipos de colunas e excelente escalabilidade. Claro, a resina foi projetada para mostrar excelente estabilidade a temperaturas de até 65 鈩� e a álcalis para CIP eficiente.

A tecnologia exclusiva de resina desenvolvida pela Sunresin permite fabricar lotes de resina de 50 kg, diminuindo assim o risco de variabilidade e proporcionando os melhores recursos de fabricação da categoria, usando condições de GMP e controles rigorosos de CQ.

A superfície das microesferas de resina é modificada 鈥� usando uma tecnologia proprietária - para se tornar mais hidrofílica a fim de reduzir a adsorção não específica. Isso é obtido pela adição de um ligante feito de um braço espaçador de cadeia longa, de modo que o impedimento estérico é reduzido, a taxa de transferência de massa é aumentada e a alta ligação dinâmica é garantida. A superfície das esferas é então funcionalizada com poli(dT) para permitir a captura de mRNA por meio do pareamento de bases com a cauda poliA do mRNA.

Neste pôster, apresentamos aplicações na purificação de mRNA de 1200nt usando Oligo dT usando captura e liberação sob condições padrão de purificação de mRNA. Além disso, o revestimento realizado na resina permite a redução no DNA plasmídico e outros componentes da mistura de transcrição.

Também apresentamos as resinas magnéticas recentemente desenvolvidas funcionalizadas com oligo dT para fácil purificação e separação em estágios de desenvolvimento de P&D. Essas esferas magnéticas começam a partir de uma resina central de poliestireno divinilbenzeno feita por uma tecnologia de semeadura exclusiva que permite fazer esferas monodimensionadas de 1 a 3 mícrons. Essas esferas são então revestidas com Fe3O4 e então totalmente revestidas com uma casca de poliuretano que protege totalmente as esferas de liberar o material paramagnético.

Essas partículas magnéticas permitem a separação fácil e rápida do mRNA, o que aprimora o processo de desenvolvimento e triagem de novas terapias genéticas.