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Seplife®6FF

Descrição do Produto

Resina de cromatografia de agarose de fluxo rápido

Seplife 6FF

Perfil do produto:
Seplife® 6FFresina de cromatografia de agarose de fluxo rápidoé formado por reticulação no Seplife® 6Bmeio de cromatografia em agarose. Sua estabilidade química e propriedades físicas são significativamente aprimoradas com altas taxas de fluxo, alta carga e baixa adsorção específica. Possui alta taxa de recuperação e pode ser reutilizado diversas vezes. Pode ser usado paracromatografia de filtração em gelepurificação de proteínas,ácidos nucleicosepeptídeosa jusante debiofarmacêuticos e bioengenharia.

20200804083702

Parâmetros de resina:

Código de resina Seplife® 6FF
Aparência Contas de esfera branca
Tamanho de partícula (μm) 45 ~ 165
Matriz 6% de agarose reticulada
Taxa de fluxo (cm / h) <300
Pressão (MPa) 0.2
estabilidade de pH 2 ~ 12 (longo prazo), 2 ~ 14 (curto prazo, CIP)
Inscrição Proteínas, ácidos nucleicos e peptídeos a jusante de
biofarmacêuticos e bioengenharia
Estabilidade química Estável em solução tampão de água: NaOH 2M; 70% de etanol, 30%
isopropanol, 30% de acetonitrila, 1% de SDS, 6M de guanidina
cloridrato, ureia 8M.
Limite de exclusão 10.000 ~ 4 × 106 globulina
Condições de teste: Coluna de cromatografia 16 mm * 300 mm; Altura do leito da coluna 15 cm; temperatura 25 ℃;
a fase móvel era de NaCl 0,1 mol / L.


Instrução de teste:
1. Embalagem em coluna
A embalagem é realizada de acordo com os procedimentos operacionais padrão. Deve-se garantir que cada material esteja à temperatura de operação e que o gel precise ser desgaseificado antes de ser embalado.
2. Equilíbrio
Equilibre a coluna com 2 a 5 volumes de coluna da balança de carregamento, certificando-se de que a condutividade e o pH do efluente são exatamente iguais à condutividade e ao pH do tampão de carregamento.
3. Carregamento de amostra
(1) A amostra é preparada com um tampão e a amostra turva é centrifugada e filtrada para carregamento. Amostras com teor excessivo de sal e concentração muito pequena devem ser tratadas primeiro e, em seguida, carregadas.
(2) A separação dos componentes da amostra pelo meio é realizada de acordo com o peso molecular dos componentes, e o peso molecular é primeiro eliminado.
(3) O volume de carregamento é cerca de 1-2% do volume da coluna e quanto menor, melhor desempenho de separação.
4.Elução
A eluição foi realizada com tampão e a taxa de fluxo e a composição do tampão foram mantidas constantes durante a eluição.
5. Regeneração
Geralmente é lavado com um tampão para equilibrar e pode ser usado novamente. Algumas proteínas ou lipídios inativados não podem ser lavados durante a regeneração e podem ser removidos por limpeza no local (CIP).
6.CIP
(1) Para uma proteína com ligações iônicas, ela pode ser removida com 0,5 a 1 volume do leito da coluna de NaCl 2 M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas ou lipídios ligados hidrofobicamente, ela pode ser removida com 1 volume de leito de coluna de NaOH 0,1 M. (3) Para proteínas, lipídios, etc. fortemente ligados hidrofobicamente, ele pode ser lavado com 4 a 10 volumes de coluna de etanol a 70% ou isopropanol a 30%. No entanto, deve-se notar que a concentração do solvente orgânico é aumentada gradualmente em um gradiente, caso contrário, bolhas são facilmente geradas.
Após a limpeza ser concluída, equilibre a coluna com pelo menos 3 volumes de leito de tampão de equilíbrio até que o pH e a condutância permaneçam inalterados.
7. Armazenamento
Selado e armazenado a 4 ~ 30 ℃ (20% de etanol na solução de armazenamento), seco, ventilado, limpo, não congelado; as colunas usadas são armazenadas em solução de etanol a 20% a 4 ℃.


Cuidado:
(1) O volume da amostra deve ser concentrado o máximo possível antes de usar a filtração em gel.
(2) A amostra deve ser clarificada sem partículas.
(3) Para obter a resolução mais alta, o volume de carregamento não pode exceder 5% do volume do leito.
(4) A cromatografia em coluna deve ser realizada após a amostra e o meio cromatográfico deve ser perfeitamente equilibrado com o tampão de eluição.
(5) O leito da coluna deve ser plano, livre de ranhuras e bolhas de ar, caso contrário, deverá ser remontado.
(6) A fim de proteger a estabilidade e atividade da proteína, uma proteína tampão de purificação é selecionada.
(7) A fim de evitar interação iônica não específica entre a proteína e o meio, até 0,15 mol / L de NaCl pode ser adicionado ao tampão.
(8) De acordo com o peso molecular da proteína-alvo, o meio mais próximo da faixa de separação mediana é selecionado.
(9) A taxa de fluxo deve ser estritamente controlada durante o processo de eluição, e não muito rápido.
(10) Durante o carregamento e todo o processo de eluição, a superfície do cilindro é impedida de secar.
(11) Este produto deve evitar o contato com agentes oxidantes e evitar a exposição prolongada ao ar.



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