SUNRESIN STOCK CODE 300487

seplite@sunresin.com + 86-29-89182091

Mais produtos

Indústrias de aplicação

Contate-Nos

Sunresin Park, No.135, jinye Road, Xi'an Hitech Industrial Development Zone, Shaanxi-710076, China
E-mail: seplite@sunresin.comt
Tel: + 86-29-89182091

Ni Seplife® 6FF (IDA)

Processamento de purificação de proteína, ácido nucleico e polipeptídeo
Descrição do Produto

Resina de cromatografia de agarose quelante de níquel

Instruções Ni Seplife 6FF (IDA)

Perfil do produto:
Cromatografia em Agarose Quelante Ni(IDA) está ligando ácido iminodiacético em meio de agarose 6FF e, em seguida, quelante íon de Ni2 + para ser como ummídia cromatográfica de afinidade. É amplamente utilizado para oprocessamento de proteína,ácido nucleicoepurificação de polipeptídeoa jusante debiofarmacêutica e bioengenharia.

20200804083655


Parâmetros de resina:

Código de resina Ni Seplife® 6FF (IDA)
Aparência Esferas de gel
Tamanho de partícula (μm) 45 ~ 165
Matriz Seplife 6FF
Taxa de fluxo (cm / h) ≥370
Pressão (MPa) 0.3
Capacidade de ligação de íons (Ni2 + umol / ml): ~ 15
Taxa de fluxo linear de referência 60cm / h
estabilidade de pH 3 ~ 13 (longo prazo), 2 ~ 14 (curto prazo, CIP)
Inscrição Purificação de proteína His-tag
Estabilidade química Estável em solução tampão de água, 0,1 mol / L NaOH; 0,01 mol / L HCl;
8 mol / L de carbamida


Instrução de teste:
1. Embalagem em coluna
(1) Todo o material e reagente em temperatura ambiente, preparando tampão inicial e tampão de eluição.
(2) Retire a amostra de resina de acordo com o tamanho da coluna, lave com etanol a 20% para secar, use tampão (a proporção de resina: tampão = 3: 1) para transformar em homogenato e tratamento de desgaseificação.
(3) Use água ou tampão para manter o interior ou o fundo da coluna úmido, o nível de água ou tampão deve ser mais alto do que o filtro de mambrana e certifique-se de que o fundo da coluna não tenha bolhas.
(4) Use uma haste de vidro para guiar o homogeneizado na coluna junto com a face interna da coluna uma vez para evitar qualquer bolha. Abra a válvula de saída da coluna para fazer a resina assentar livremente e conecte a tampa superior da coluna também.
(5) Abra a bomba peristáltica, use o tampão para passar pela coluna na taxa de fluxo de 1,33 vezes do que a taxa de fluxo do tampão normal usando. Use o buffer 2-3BV para fazer o equilíbrio da coluna.
2. Equilíbrio
Equilibre com 2 ~ 5 volumes de leito de solução tampão inicial até que a condutividade, o pH e outros parâmetros não sejam alterados.
3. Carregamento de amostra
(1) A amostra é geralmente dissolvida no tampão inicial de pH 6-8, e aumentar o pH do tampão de carregamento pode aumentar o carregamento.
(2) O tampão não deve conter EDTA e citrato, e é melhor evitar agentes redutores como mercaptoetanol e DTT.
(3) A solução tampão comumente usada tem 10 a 100 mmol / L de solução tampão de fosfato de sódio, 20 a 200 mmol / L de solução tampão Tris-HCl.
(4) 0,15 a 0,5 mol / L de NaCl são geralmente adicionados ao tampão para eliminar a troca iônica.
(5) Ao usar um gel de agarose quelato de níquel pela primeira vez, é recomendado o uso de 50 mmol / L de PBS (50 mmol / L de NaH2PO4, 0,5 mol / L de NaCl, pH 7,4) como tampão inicial.
4.Elução
A eluição é geralmente dividida nos seguintes métodos:
(1) Reduzir a eluição de pH: A maioria das proteínas será eluída em pH 6-4 (também em pH 3-4), e o tampão pode ser acetato de sódio, ácido cítrico e sistemas tampão de fosfato.
(2) Eluição competitiva: aumentar ou aumentar linearmente a concentração de substâncias competidoras com afinidade a íons metálicos (por exemplo, 0-0,5 mol / L imidazol, 0-50 mmol / L histidina, 0-2 mol / L NH4Cl).
(3) Eluição do agente quelante: os agentes quelantes, como EDTA e EGTA, podem reagir com íons metálicos para fazer com que a proteína elua. No entanto, esse método não pode separar proteínas diferentes e afeta a adsorção de proteínas, resultando na incapacidade de suspensão da proteína de fusão.

Observações:
(1) Ao usar pela primeira vez, se a concentração de imidazol necessária para a eluição for incerta, é recomendado adicionar 10mmol / L, 20mmol / L, 50mmol / L, 100mmol / L, 200mmol / L, 500mmol / L para o buffer inicial. O imidazol foi eluído e coletado de baixo para alto, respectivamente, e os resultados eluídos foram identificados por eletroforese SDS-PAGE.
(2) O imidazol é alcalino, e o pH é ajustado com HCl após a preparação do tampão correspondente.
(3) Reduzir a eluição do pH e eluir o agente quelante fará com que os íons de metal caiam, e os íons de metal precisam ser requelados antes do próximo uso.
(4) Condicionalmente, uma eluição linear gradiente de imidazol pode ser realizada para determinar as condições de eluição preferidas.
Para os métodos de eluição acima, 150 a 500 mmol / L de NaCl devem ser adicionados ao tampão para eliminar a troca iônica.
5. Regeneração
(1) O gel deve ser denickado e regenerado após uso repetido ou quando for necessário substituir os íons metálicos quelados. Método de remoção de níquel: primeiro enxágue a coluna com 5 a 10 volumes de leito de água destilada, depois enxágue a coluna com 5 a 10 volumes de leito de EDTA 100 mmol / L e, finalmente, use 2 a 3 volumes de leito de lavagens de NaCl 0,5 mol / L afastado EDTA residual.
(2) A coluna usada várias vezes geralmente precisa ser limpa após a remoção do níquel. Método de limpeza: Inverta a coluna com NaOH 0,1 ~ 1,0 mol / L, mantenha a 50 cm / h por 1 ~ 2 h, não só pode remover as impurezas fortes, mas também remover a fonte de calor.
(3) Íons metálicos requelantes após a limpeza. Método de quelação: em primeiro lugar, a coluna após a remoção do níquel é totalmente equilibrada com 2 a 5 volumes de leito de água destilada e, em seguida, 0,1 a 0,3 mol / L de solução de sal de metal é usada para passar 5 a 10 volumes de leito para quelar íons de metal. Enxágüe com 5 a 10 volumes de cama de água destilada para remover íons de metal não quelados.
6.CIP
(1) Remoção de proteínas adsorvidas por troca iônica: 2 a 3 volumes de leito foram lavados de volta por solução de NaCl 2 mol / L.
(2) Remoção de proteínas e lipídios hidrofóbicos fortes, etc .: 4 volumes de leito foram lavados de volta com etanol a 70% ou isopropanol a 30%.
(3) Remoção da proteína precipitada, proteína hidrofóbica: etapa de regeneração do gel de referência.
7. Armazenamento
Selado e armazenado a 4 ~ 30 ° C (etanol 20% em solução de armazenamento), seco, ventilado, limpo, não congelado; as colunas usadas são armazenadas em 4 ~ 8 ° C, solução de etanol a 20%.

Cuidado:
(1) A amostra e Ni seplife®6FF (IDA) devem ser equilibrados com o tampão de eluição e então ir para a coluna de cromatografia.
(2) O leito da coluna deve ser plano, livre de ranhuras e bolhas de ar, caso contrário, deve ser reinstalado.
(3) Na utilização, certifique-se de que a temperatura da coluna e do buffer sejam iguais, evitando a geração de bolhas no leito da coluna e afetando o efeito de purificação.
(4) A taxa de fluxo deve ser estritamente controlada durante o processo de eluição e não muito rápido.
(5) Durante o carregamento e todo o processo de eluição, a superfície do cilindro é impedida de secar.

Nossa Lista de Produtos

Últimas notícias

06 2021-09
Sunresin (SZ300487, China) e 2021 Meio ano Resultado Resumo

Código de Estoque: 300487 Abreviação de ações: Tecnologia Sunresin Código de títulos: 123027 Bond Abreviação: Bond Convertível Sunresin As informações a seguir representa um resumo do relatório de meio ano de 2021 da empresa. A informação pública oficial divulgada no chinês está de acordo

04 2021-09
Sunresin para se juntar à série FTSE Global Equity Index

O Sunresin será adicionado à série de índice de ações global FTSE (\"Geis \"), após a mais recente revisão semestral da FTSE. Esta inclusão se tornará eficaz após o fechamento de negócios na sexta-feira, 17 de setembro de 2021. De acordo com a última revisão em 20 de agosto, 71 a-ações, incluindo 11 grandes

27 2021-08
Sunresin (SZ300487, China) e 2021 Meio ano Resultado Resumo

Durante o período de relatório do primeiro semestre 2021, o negócio da Companhia continua se recuperando fortemente com uma receita operacional de RMB 556 milhões, um aumento do ano de 27,6%. O lucro líquido atribuível aos acionistas atingiu 150 milhões de RMB, com aumento de 29%. O fluxo de caixa líquido de atividades operacionais atingiu 93 milhões de RMB, com aumento de 122%. Depois de transformar positivo em 2020, o fluxo de caixa líquido continuou a permanecer em território positivo no primeiro semestre 2021.

Leave a Message
Aqui para fornecer soluções completas de separação e purificação
Sunresin Park, No.135, jinye Road, Xi’an Hi-tech Industrial Development Zone, Shaanxi-710076, China
Envia-nos um email:
Ligue para nós:
+ 86-29-89182091

SIGA-NOS

Copyright ©Sunresin New Materials Co.Ltd.,Xi'an todos os direitos reservados