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CM Seplife® FF

Matriz de agarose, grupo CM, fluxo rápido, equivalente a CM Sepharose FF
Descrição do Produto

Resina para cromatografia em agarose

CM seplife FF

Perfil do produto:
O meio de cromatografia CM seplife® FF é um novo tipo de meio de cromatografia em agarose altamente reticulado, desenvolvido independentemente pela Sunresin. É um cátion fraco formado pela ligação de grupos carboximetil ao meio de cromatografia de filtração em gel de agarose.Meio de cromatografia de troca iônica. Possui alta taxa de fluxo, baixa contrapressão, alta carga dinâmica, boa estabilidade química e propriedades mecânicas, baixa adsorção não específica, alta taxa de recuperação, fácil de aumentar, pode encurtar o tempo de produção e melhorar a eficiência da produção. Amplamente utilizado empurificação de cromatografia de troca iônicade proteínas a jusante,ácidos nucleicosepeptídeosnobiofármacos e bioengenharia.

Resina de cromatografia de agarose

Parâmetros de resina:

Código de resina CM Seplife®FF
Aparência Contas de esfera branca
Tamanho da partícula(μm) 45 ~ 165
Matriz Seplife 6FF
Taxa de fluxo (cm / h) <750
Pressão (MPa) 0.3
Resistência ao calor 121 ℃, na água por 30 minutos
estabilidade de pH 4 ~ 13 (longo prazo), 3 ~ 14 (curto prazo, CIP)
Inscrição Proteínas, ácidos nucleicos e peptídeos a jusante
de biofármacos e bioengenharia
Estabilidade química Estável nos seguintes líquidos: todos os tampões aquosos comuns; Hidróxido de sódio 1 mol / L; 8 mol / L de ureia; Cloridrato de guanidina 8 mol / L;
70% de etanol
Adsorção (mg / ml) 60mg / ml lisozima / ml
Capacidade de troca iônica 0,09 ~ 0,13 mmol / ml
Temp. De trabalho 4 ~ 40 ℃
Condições de teste: Coluna de cromatografia 16 mm * 300 mm; Altura do leito da coluna 15 cm; temperatura 25 ℃;
a fase móvel era de NaCl 0,1 mol / L.


Instrução de teste:
1. Embalagem em coluna
Operação de embalagem de acordo com os procedimentos operacionais padrão. Deve-se garantir que cada material esteja à temperatura de trabalho e que o gel precise ser desgaseificado antes da embalagem.
2. Equilíbrio
Equilibre a coluna com 2 a 5 vezes o volume do leito da solução de equilíbrio de carga. Certifique-se de que a condutividade e o pH do efluente sejam exatamente iguais à condutividade e ao pH do tampão de carregamento. A solução de equilíbrio é uma solução tampão de baixa concentração, como Tris, PBS, etc.
3. carregando
(1) A amostra é preparada com a solução de equilíbrio, e a amostra turva deve ser centrifugada e filtrada antes do carregamento. Amostras com muita concentração de sal são preparadas após o processamento.
(2) Geralmente, o produto alvo é ligado à coluna, as impurezas são lavadas com a solução de equilíbrio e então o eluente é selecionado para lavar o produto alvo.
(3) O grau em que o meio adsorve os componentes da amostra depende das propriedades carregadas da amostra, da força iônica da fase móvel e do valor de pH. A concentração de sal é pequena e o meio adsorve os componentes da amostra com mais firmeza. Ao usar meio de cromatografia CM, o valor de pH recomendado é 1 unidade maior que o ponto isoelétrico do produto alvo.
4.Elução
Aumente a concentração de sal ou aumente o valor do pH para eluição, comumente usado para aumentar a concentração de sal.
5. Regeneração
Geralmente, primeiro lave com um tampão de alta concentração de sal (contendo 1 ~ 2mol / L NaCl) ou reduza o pH em mais de 10 vezes o volume da coluna e, em seguida, lave até o equilíbrio com a solução de equilíbrio ao ligar a proteína.
Se houver proteínas ou lipídios inativados que não podem ser removidos durante a regeneração, eles podem ser removidos com CIP.
6. Limpeza no local
(1) Para a proteína ligada por ligação iônica, ela pode ser removida em 0,5 ~ 1 vezes o volume do leito de NaCl 2M.
(2) Para proteínas precipitadas, proteínas ou lipídios ligados hidrofobicamente, você pode primeiro enxaguar com 1M de volume de leito de NaOH 0,1M e, em seguida, lavar com solução tampão de equilíbrio até que o pH seja neutro.
(3) Para proteínas e lipídios com forte ligação hidrofóbica, lave com 4 a 10 vezes o volume do leito de etanol 70% ou álcool isopropílico 30%. Deve-se notar que a concentração de solvente orgânico aumenta gradativamente, caso contrário, são geradas bolhas.
7. Armazenamento
Selado e armazenado a 4 ~ 30 ℃ (solução de preservação é 20% etanol) em local seco, ventilado, limpo e não pode ser congelado; as colunas usadas são armazenadas a 4 ~ 8 ℃, solução de etanol a 20%.
8. Transporte
Evite luz solar, chuva e pressões fortes durante o transporte, sendo estritamente proibido transportar com materiais tóxicos e nocivos.


Assuntos que requerem atenção:
(1) Seleção de coluna: Em teoria, contanto que a coluna seja longa o suficiente, você pode obter a resolução ideal, mas como a taxa de fluxo da coluna está relacionada ao gradiente de pressão, aumentar o comprimento da coluna torna a taxa de fluxo mais lenta, o pico amplia e diminui a resolução; o diâmetro da coluna aumenta, de modo que a irregularidade do fluxo de líquido aumenta e a resolução diminui significativamente. UMA
(2) O pH e a força iônica do tampão de eluição devem ser estritamente controlados durante o processo de purificação. A amostra e o meio de cromatografia CM devem ser completamente equilibrados com tampão de eluição antes da cromatografia em coluna. UMA
(3) O leito da coluna instalado deve ser plano e livre de canais e bolhas, caso contrário, deve ser reinstalado.
(4) A vazão deve ser estritamente controlada durante a eluição e não muito rápida.
(5) O volume da amostra deve ser pequeno e a concentração não deve ser muito alta.
(6) Evite que o cilindro seque durante a adição da amostra e durante todo o processo de eluição.

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